表2：

　　市    区城市肠道原虫监测点粪检结果复核记录表

　　＊复核结果（符合=1；不符合=0）；多重感染有一种虫种复核结果不符或漏检既算为不合格。

　　阳性符合率：    %              复核人：                     复核日期：           

　　附录3：

　　肠道原虫检查方法与形态鉴别

　　一、检查方法

　　1.实验器材

　　显微镜（10×40）、 显微镜测微尺、玻片、盖玻片、竹签、 记号笔等。

　　2.实验试剂

　　（1）0.85%盐水

　　NaCl 0.85g 蒸馏水加至100ml

　　（2）卢戈氏碘液

　　碘化钾6.0g， 碘4.0g 蒸馏水至100ml

　　（先用30ml左右蒸馏水溶解碘化钾，再加入碘混匀溶解后加蒸馏水至100ml，充分混匀后储存于棕色瓶中）

　　3.直接涂片法（用于滋养体检测）

　　3.1标本采集自然排出、无尿液掺混的新鲜粪便（注意保温），立即进行实验室检查。

　　3.2取预温洁净载物玻片一张，加滴37℃预温的生理盐水1滴～2滴。

　　3.3在保温条件下，用竹签挑取粪便标本可疑部分（如有粘液、血液、应尽可能采取粘液、血液部分），在盐水中涂抹成直径为lcm粪便薄膜，厚度以透过粪便薄膜能看清字为宜。

　　3.4盖上盖玻片，置显微镜下观察有无活动的滋养体。

　　4．碘液玻片法（用于包囊检测）

　　4.1涂片时用碘液代替生理盐水，制法及注意事项同直接涂片法。

　　4.2盖上盖玻片，显微镜下观察包囊。

　　4.3注意事项

　　（1）涂片的厚度以看清报纸上的字迹为度，太薄易漏查，太厚难以观察。

　　（2）因为虫体大小在鉴定上是重要的依据，因此显微镜必须装备有目镜测微器，还要有低倍、高倍。由于原虫很小，用低倍镜常易漏检，所以要用40X物镜检查。

　　二、病原形态鉴别

　　原虫是由单一细胞构成，属于单细胞真核动物，它所有的生命活动都是在细胞内完成的。

　　（一）基本结构

　　主要有表膜、细胞质和细胞核

　　1.表膜：包在虫体表面，可保持虫体的完整性，并参与虫体摄食、排泄、感觉、运动等生理活动，具有很强的抗原性。一般在电镜下观察。

　　2.细胞质：多数原虫分内质与外质两部分。

　　（1）内质：呈细颗粒状，占细胞质的大部分，内含细胞核、食物泡、伸缩泡等。

　　（2）外质：分布在虫体表层，透明或有微细颗粒，运动细胞器是由外质形成。

　　伪足：是肉足亚门原虫所特有的临时性运动器，为外质的暂时性突出部分，常见为叶状，偶可见树根状或网状。

　　鞭毛：是鞭毛虫纲原虫的运动细胞器官、，为外质底下的毛基体发出的细胞质丝状延伸部分，鞭毛数目因虫种而异。

　　纤毛：是纤毛虫纲原虫的运动细胞器，结构与鞭毛基本相似，也是从基体发出，但数量多，短而尖细。

　　波动膜：是毛滴虫的运动细胞器。

　　3.细胞核

　　细胞核在内质中，与原虫的生长、繁殖有关，是原虫分类鉴别的重要依据。分两种类型：

　　（1）泡状核：圆、椭圆或相类似型状。核染色质颗粒量少，分布不均，在碱性染料下着色很浅，呈现为泡状核。阿米巴、鞭毛虫及纤毛虫的小核均属此型。

　　（2）实质核：形状多样，常见有椭圆形、肾形或马蹄形，核染色质颗粒量多。纤毛虫的大核属此型。

　　示意图

　　（二）鉴别要点

　　1.大小：最小直径仅2μm，大可达200μm

　　2.运动：运动形式 — 伪足、鞭毛、纤毛；

　　运动速度 — 活泼或缓慢；

　　运动方向 — 定向或不定向； 

　　3.细胞浆：界限是否明显，浆内有无吞噬的红细胞；

　　4.细胞核：核数量、形状、位置，核膜厚、薄，核仁大小、形状、排列位置；

　　5.细胞质：滋养体——细胞质颗粒细密或粗大；

　　包囊——囊壁厚、薄，折光度，细胞质有无纤丝状排列、糖元块和拟染色体。

　　（三）常见肠道原虫的形态特征

　　1.溶组织内阿米巴

　　溶组织内阿米巴是阿米巴痢疾和阿米巴结肠炎的病原体，寄生在结肠内，主要在横结肠和盲肠，可侵犯肝、肺、脑等器官，引起肠外感染。其生活史发育阶段为：滋养体、囊前期、包囊和囊后期。在粪便中常见滋养体和包囊，在组织中仅有滋养体。成熟的四核包囊是感染期，滋养体为致病期。

　　（1）滋养体

　　溶组织内阿米巴滋养体具有侵袭性，随时可吞噬RBC；虫体大小在10～60μm之间，胞浆分为内外两层，外浆透明而均匀，折光强，内浆呈细颗粒状，当外浆伸出形成伪足作定向运动时，内浆颗粒即涌入伪足内，使虫体前进。虫体形态多变，借助伪足活动，运动活跃，在新鲜脓血便和阿米巴肝脓肿穿刺液中，滋养体可以每秒5微米的速度活泼运动，以二分裂法增值。

　　（2）包囊：

　　直径10～20μm，囊壁光滑，透明、折光性强、不着色，厚约0.5μm，包囊内含1～4个核，成熟包囊内常见1个或多个两端钝圆的长棒状拟染色体。

　　2.结肠内阿米巴

　　结肠内阿米巴是非致病性阿米巴，也可引起腹泻，主要寄生在人体盲肠和结肠，常与溶组织阿米巴共存，是肠道最常见的共栖原虫。必须与溶组织阿米巴区别。

　　（1）滋养体：直径15 ～ 50μm，运动迟缓，无定向，内外质界限不明显，仅在伪足形成时才能看见外质，内质呈颗粒状，内含1个细胞核和许多食物泡，食物泡中含有细菌，不含红细胞。核仁较大，常偏位。

　　（2）包囊：球形，较溶组织阿米巴大，直径10～30μm，1～8个细胞核，偶见成熟包囊超过8个核，细胞质颗粒状，未成熟包囊常有较大的深棕色的糖原泡，位于核周围。拟染色体常不清晰，似碎片或草束状，两端尖细。

　　3.微小内蜓阿米巴

　　微小内蜓阿米巴是最常见的小型阿米巴，滋养体寄生在大肠，在大肠中成囊，成熟包囊污染食物和水源，偶可引起腹泻。

　　（1）滋养体：直径6 ～ 15μm，一般小于10μm，内外浆不明显，伪足透明，短而钝，运动缓慢，不定向，核膜与核仁间有核丝连接，核仁大而不规则，位于中心或偏位。

　　（2）包囊：卵圆形，5～14μm，囊壁有折光，1 ～ 4个细胞核，集中在包囊一端，核仁大，常偏于一侧。偶见小而弯曲的拟染色体。

　　4.布氏嗜碘阿米巴

　　布氏嗜碘阿米巴是以包囊中独居特征的糖原泡而命名，人猪均可感染，是猪最常见的阿米巴。滋养体寄生在大肠，主要通过粪便排出的包囊传播。

　　（1）滋养体：形态不一，直径8～20μm，细胞核较大，核仁约占直径的1/2，位于核中央，伪足宽大，不吞噬红细胞。细胞质内有1～2个糖原泡，为鉴定的重要特征。

　　（2）包囊：直径5～20μm，囊壁折光性强，成熟包囊仅1个核，核仁位于核的一端，，包囊中无拟染色体，但有1个大而明显的糖原泡，碘染色后，糖原泡呈红棕色团块。

　　寄生人体肠道的阿米巴滋养体鉴别特征

　　寄生人体肠道的阿米巴包囊鉴别特征（碘染色）

　　5.蓝氏贾第鞭毛虫

　　蓝氏贾第虫是最原始的原核生物之一，生活史有滋养体和包囊两个阶段，在粪便中均可查见。

　　（1）滋养体：形似半个倒梨形，前段钝圆，后端尖细，长：9～21μm，宽5～15μm，厚2～4μm。腹面扁平，背面隆起，胞浆呈颗粒状，腹面前半部至3/4处凹陷形成左右2个大吸盘，一对椭圆形的核位于吸盘中央，虫体有两条轴索和4对鞭毛。

　　（2）包囊：椭圆形，大小8～12×7～10μm；囊壁较厚，折光性强，细胞质收缩形成双层壁，与细胞间有明显间隙，可见2-4个细胞核，多偏于一端。囊内可见鞭毛残体、丝状物及轴柱等，碘染色后呈棕黄色。

　　6.结肠小袋纤毛虫

　　结肠小袋纤毛虫是人体最大的寄生原虫，寄生宿主广泛，通常认为猪是人体感染的主要传染源。主要寄生于宿主结肠，引起痢疾。

　　（1）滋养体：椭圆形，前端略尖，后端较钝，虫体甚大，大小50～200×30 ～ 100μm，周身有纤毛，呈斜纵排列，能前后运动。胞浆内有2个细胞核，大核呈肾形，小核呈球形（一般不易见），新鲜粪便可见虫体前、后端各有一个伸缩泡。

　　（2）包囊：圆或卵圆形，直径40～60μm，囊壁厚而透明，呈双层内有核和伸缩泡各1个。新鲜包囊可见囊内有活动的滋养体。寄生人体的滋养体很少转变为包囊，包囊主要在猪肠内形成。

　　7.人芽囊原虫

　　人芽囊原虫是一种寄生于人和其它灵长类动物肠道（主要寄生在回盲部）原虫，能引起腹泻。光镜下观察，其有多种类型，一般认为，阿米巴型为致病期，包囊为感染期。根据体外形态推测，其发发育途径为包囊 —空泡型—阿米巴型。包囊在体外培养的条件下，可脱囊形成纤丝层发育为完全的空泡型虫体，并以二分裂方式大量增殖。

　　（1）滋养体

　　空泡型（又称中心体型）盐水涂片中呈球形，直径4～ 15μm，边缘有不规则的月牙结构，内可见1 ～ 2个圆形颗粒，核结构部清。染色后，可见虫体中央有一较大的空泡（中心体），月牙形，红色，位于虫体边缘，数量不等，一般1～2个。

　　阿米巴型（又称变形型）虫体形态不规则，移动缓慢，形似溶组织阿米巴滋养体，可见伪足。

　　颗粒型虫体的中心体内充颗粒状物质，可将其分为代谢颗粒、脂肪颗粒和繁殖颗粒，系由空泡型发育而来。

　　（2）包囊

　　圆形或卵圆形，直径23.78～7.74μm，囊壁较厚，胞质中有1～3个线粒体和多个大小不等的糖原泡。研究发现也存在薄壁包囊，可在肠道内增殖，导致自体感染，而厚壁包囊则导致肠外（肛-口）传播感染。包囊在体外培养的条件下，可脱囊形成纤丝层已发育成完全的空泡型虫体，并以二分裂方式大量增殖。

　　（四）注意事项

　　1.标本要新鲜，收样后尽快检验，如疑似活动期阿米巴病人，因属其重新留样，立即送检。

　　2.涂片时，尽量在粪便多部位挑取，腹泻样本，要挑取粘液和脓血部位。

　　3.涂片后应立即镜检，以免干燥后影响结果观察。

　　4.要使用40×物镜检查；

　　5.涂片标本要加盖玻片后镜检，以免污染镜头；

　　6.使用测微尺测量虫体大小。